今天跟大家聊一聊植物R基因数据PRGdb。
什么是R基因?就是植物的抗病基因(Plant Resistance Gene)。不像动物有免疫系统免疫细胞,植物并没有自己的免疫细胞,那么植物是怎样对抗病原入侵的呢?我们首先来看看植物响应病原菌的免疫机制:
面对病原菌的入侵,植物主要有两个阶段的防御机制:广谱性防御PTI(PAMP-triggered immunity)和特异性防御ETI(effector triggered immunity)。
具体过程是这样的:病原菌侵染植物时,病原相关的一些细菌脂多糖,鞭毛蛋白,脂肽,肽聚糖等,统称病原\微生物相关的分子模板(pathogen/microbe associated molecular pattern, PAMP/MAMP),被植物相应的模板识别受体(pattern recognition receptors, PRR)所识别,引发广谱性的防御反应,抑制病原菌的初步感染。然后病原菌见招拆招,利用特异性的效应蛋白(effector)来抑制植物的PTI,帮助病原在植物体内繁殖或扩散。这时候植物当然不能怂,针对病原特定的效应蛋白,某些植物进化出抗病基因(R基因)来识别效应蛋白,从而触发植物自身的超敏反应,导致植物细胞凋亡,阻止病原菌进一步扩散。这步反应就是效应蛋白诱发的免疫(effector triggered immunity, ETI)(图1)。
图1 植物抵抗病原菌入侵的机制
植物的PTI和ETI就像动物细胞中的先天性免疫和后天性免疫,也是一个是广谱性的一个是特异性的。其中植物R基因在ETI中发挥着关键的作用。R基因一般有几个特定的结构域,不同类型的R基因可以有不同的结构域组合。比如以下就是R基因的常见结构:由亮氨酸重复区(leucine-rich repeat, LRR)、核苷酸结合区(nucleotide-binding, NB)和TIR(Toll/interleukin-1-receptor)组成。
这些不同结构域的不同组合就形成了多种不同类型的R基因,如下图所示:
植物R基因数据库(Plant Resistance Gene database, PRGdb),http://prgdb.crg.eu/wiki/Main_Page,就是关于植物R基因的公共数据库,该数据库最新版本(2013)收录了106373个241种植物的R基因,并且会不断更新丰富。这些R基因有五个来源:
从已有文献报道中收集;
从NCBI GenBank中收集;
从NCBI UniGene中预测;
从Pythozome数据库中预测;
由其他科研工作者上传。
PRGdb共有10种结构域,包括MLO,PRW8,GNK2,CC,TIR,NBS,LRR,Receptor-Like Kinase,Ser-Thr Kinase,others。另外,PRGdb还收录了138种病原菌共23种效应基因(avirulence genes)和120种疾病信息。
下面我们来看看如何用PRGdb搜索感兴趣的R基因:
PRGdb提供了两种方法搜索R基因:根据R基因类型搜索和根据R基因含有的结构域搜索。例如我们想知道拟南芥有哪些文献已报道的TNL类型的R基因,那么我们从数据库首页下方的”Search”——“Classes”里设置搜索条件,分别选择”Reference R-Gene, manually curated”,“Arabidopsis thaliana”和”TNL”,点击”search”。
搜出来了7个基因:
点击基因名字,我们就可以得到该R基因的详细信息,包括CDS序列、氨基酸序列、基因功能描述、结构域位置和序列、疾病等。
如果你手头上有一堆unigene,想知道里面有没有R基因,也可以在PRGdb进行blast比对,搜索R基因。
但亲测了一下,不知道文件大小上限是多少,反正试了一个37M的fasta文件,出错;截一半数据上传,也出错,心好累……
有什么方法可以对手头上的大量unigene预测R基因呢?当然有哒!其实基迪奥的转录组测序就提供了植物抗病基因数据库的注释,提供详细的R基因注释结果,包括R基因名称、类型、物种、注释等信息,还有分类柱状图,直观显示各种类型R基因的数量,省时省力省心啊!
最后再强调一点,植物R基因的研究在阐明植物抵抗病原菌的分子机理、以及农作物的育种改良方面都发挥着很重要的作用。比如我们可以将拟南芥的抗病基因转入番茄中,使番茄也获得了抗某种病的能力,从而获得抗病番茄。想了解更多植物抗病和R基因的知识,可以参加我们下周三的“转录组测序在病原宿主互作中的应用”在线课堂。
病原宿主互作的原理解析
□ 病原宿主互作的分子机理
□ KEGG中相关pathway的解读
□ R基因类型以及结构解析
Dual RNA-seq应用于该领域的项目设计要点
□ 如何选择建库策略
□ 合理的测序量是多少
□ 在取样上,我们应该注意哪些问题
□ 都有哪些定制化生物信息分析策略有助于开展此类研究
交流时间:
12月21日(下周三)下午16:00
交流嘉宾:
周老师
报名地址:
https://ke.qq.com/course/141293#tuin=8e8efa7
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