何为狼疮抗凝物？如何检测？

来源：pkuph检验科

狼疮抗凝物( Lupus anticoagulants，LAC) 是一种磷脂依赖的病理性循环抗凝物质，为IgG 或IgM 的异质性免疫球蛋白，通过结合2-glycoprotein I，人凝血酶原及其他磷脂复合物来干扰磷脂依赖的凝血过程，使凝血时间延长。

持续的LAC阳性患者被认为有较高的血栓形成和复发风险，也是不明原因习惯性流产、死胎、易栓性疾病及某些自身免疫性疾病的危险信号。LAC的检测包括筛查试验、确认试验和复合试验。由于LAC抗体的异质性和检测试剂的多样性，检测过程中影响因素繁杂，且LAC检测目前尚无参考物质和参考方法，因此如何确保检测结果的准确性对实验室检测人员来说是一大挑战。

1、筛查试验 

理论上，任何依赖磷脂的凝血试验都可作为LAC的筛查试验( screen test)，如高岭土凝固时间( kaolin clotting time，KCT) 和活化部分凝血活酶时间( APTT)。KCT一直被认为是非常敏感的LAC筛查试验，但是高岭土作为一种颗粒物质，不适用于光学凝固检测系统，难以自动化，且易于形成沉淀，其检测结果的重复性较差。

临床上有使用APTT作为LAC筛查试验，然而由于不同商品试剂盒中磷脂的种类和含量不同，导致LAC检测的敏感性存在明显差异。实验证实，使用磷脂含量较多的检测试剂可以消除LAC对APTT检测结果的影响。

临床上更多使用的是稀释蝰蛇毒时间试验( dilute Ｒussell viper venom test，dRVVT)，其原理是在待测血浆中加入激活剂蝰蛇毒和钙离子，蝰蛇毒可直接活化凝血因子X，使血液凝固若待测血浆中存在LAC，则凝固时间延长。该试验是证明LAC存在的特异且简便的检测手段，在对有血栓形成倾向患者的回顾性和前瞻性研究中显示：相比KCT结果异常，dRVVT异常的患者具有更高的血栓发生风险。

为防止引入更多筛查试验导致LAC的假阳性率增加，ISTH将LAC的筛查试验限定为dRVVT和APTT( 低磷脂浓度)。CLSI指南中推荐dRVVT和APTT作为LAC的一线筛查试验，但不排斥使用其他检测方法。dRVVT因其对2-GP 依赖的LAC的高敏感性以及与血栓发生的密切相关性，成为LAC首选筛查试验，而操作简便成本低廉的APTT检测，则成为临床上与dRVVT组合的常规测试方式。

2、确认试验 

确认试验( confirmatory test) 的基本原理是通过增加磷脂浓度以抵消LAC的抗凝作用。当待测血浆中存在LAC时，在增加磷脂浓度后血浆凝固时间缩短; 相反，若存在其他凝血因子抑制物，则凝固时间不会被纠正。筛查试验异常时，需要进行确认试验。

确认试验依据检测试剂成分不同可有多种试验方法: 一种为通过反复冻融激活血小板后释放的磷脂，进行APTT，dRVVT或硅化凝血时间( silica clotting time，SCT) 试验; 另一种则为使用人工合成的双分子层或六角形相结构的磷脂作为检测试剂进行上述试验。

3、复合试验 

复合试验( integrated test) 是指对每个患者同时进行筛查试验( 低浓度磷脂试剂) 和确认试验( 高浓度磷脂试剂) ，然后计算凝血时间纠正百分比。凝血时间纠正百分比=( 筛查试验比值－确认试验比值) /筛查试验比值×100%,或者标准化LAC比值=筛查试验比值/确认试验比值的比值。

复合试验的优势在于检测低浓度的LAC，此时患者凝血时间延长可能不明显，但通过筛查试验和确认试验的比值差异却可反映出LAC的存在 。

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